Deze kit maakt gebruik van isotherme nucleïnezuuramplificatie -technologie die werkt bij kamertemperatuur en een constant temperatuurbereik (meestal 39 graden -42 graden). Het proces begint met reverse transcriptase -synthetisering van complementair DNA (cDNA) van RNA -sjablonen met behulp van specifieke primers. Het complex gevormd door recombinase en primers, geholpen door hulpeiwitten en single-streng bindende eiwitten, zoekt naar en bindt aan het doelhomologiedomein. Dit resulteert in de vorming van een D-lusregio op de homologe site, het initiëren van Strand Exchange. Zodra recombinase dissocieert, bindt polymerase aan het 3' -uiteinde van de primer, met het initiëren van ketenverlenging. De kit maakt ook gebruik van exonuclease-activiteit en specifieke moleculaire sondes voor realtime monitoring van het amplificatieproces door middel van fluorescentiedetectieapparatuur.
【Functies】
Hoge gevoeligheid
Ontworpen voor precieze RNA -amplificatie, waardoor nauwkeurige detectie wordt gewaarborgd.
Snel
De reactie is in slechts 20 minuten voltooid en biedt snelle versterking.
Stabiel
Het droge poederformaat vereenvoudigt de behandeling en opslag.
Brede compatibiliteit
Compatibel met een bereik van fluorescentiekwantitatieve PCR -instrumenten, constante temperatuurfluorescentieversterkers en andere fluorescentiedetectieapparaten.
【Primerontwerp】
Voor optimale prestaties moeten primers 30-35 bp lang zijn. Kortere primers kunnen de versterkingssnelheid en de gevoeligheid beïnvloeden. De primers zijn ontworpen om secundaire structuren te voorkomen die het versterkingsproces kunnen belemmeren. De aanbevolen ampliconlengte ligt tussen 150 - 500 bp.
【Fluorescerend sondeontwerp】
De sonde -sequentie overlapt niet met de specifieke primerherkenningsplaats, de lengte is 46-52 nt en de sequentie vermijdt Palindromic -volgorde, interne secundaire structuur en continue herhaalde bases. Er zijn vier modificatiesites in de sonde: een dspacer (tetrahydrofuran, thf) is aangemeld in het midden Erkenningssite voor exonuclease; Een fluorescerende groep is stroomopwaarts van de THF -site gemarkeerd, een blusgroep wordt stroomafwaarts gelabeld en de afstand tussen de twee groepen is 2-4 nt; THF is ongeveer 15 nt verwijderd van het 3 'uiteinde en het 3' uiteinde is gelabeld met een blokkeergroep, zoals een aminegroep, een fosfaatgroep of een spacer van een C 3-.
【Kitcompositie】
|
Comstelling |
Content |
|
Een buffer |
1,6 ml × 1 tube |
|
B -buffer |
150 μl × 1Tube |
|
Reagens |
48T |
|
Gidshandleiding |
1copie |
Opmerking:Gezien het probleem van de afbraak van nucleïnezuur, bieden RNA -serieproducten geen positieve controlesjablonen en primersondes.
【Verpakkingsspecificaties】
- Specificaties: 48 t/pack
【Khet opslag】
- Opslagomstandigheden: Bewaar op minder dan of gelijk aan -20 ºC in een constante temperatuuromgeving. Blijf weg van het licht en vermijd zware druk.
- Houdbaarheid: 14 maanden.
【Opmerking】
- Zelf ontworpen primers/sondes moeten worden toegevoegd voor de ontwikkeling van MiRA-project.
- De kit is beschikbaar in twee soorten - DNA en RNA. Het RNA -type omvat reverse transcriptase, waardoor amplificatie met RNA, dsDNA en ssDNA als sjablonen mogelijk is. Het DNA -type kan alleen versterken met dsDNA als de sjabloon.
- Beschikbaar in drie typen - Basis, fluorescerend en teststrip. Kies de juiste kit op basis van uw behoeften en gebruik de bijbehorende primers/sondes.
Populaire tags: Mira RNA isotherme snelle amplificatiekit fluorescentie -II, China mira RNA isotherme snelle amplificatiekit fluorescentie -II fabrikanten, leveranciers
